使用方(fang)法(fa)
1、開(kai)機(ji)
2、試劑配(pei)制
2.1、緩(huan)沖液(ye):取(qu)1包(bao)緩(huan)沖劑加入(ru)500mL蒸餾水或純(chun)凈水中,攪(jiao)拌溶(rong)解制成(cheng)磷酸緩(huan)沖液(ye)(pH7.6), 常(chang)溫(wen)保(bao)存(cun)。
2.2、顯(xian)色劑:取(qu)1瓶顯(xian)色劑加25mL緩(huan)沖液(ye)溶(rong)解,使用時(shi)取(qu)100μL,4℃冰箱(xiang)保(bao)存(cun)。
2.3、底 物:取(qu)1瓶底(di)物加(jia)12.5mL蒸(zheng)餾水或純(chun)凈水溶(rong)解,使用時(shi)取(qu)100μL,4℃冰箱(xiang)保(bao)存(cun);或取(qu)1瓶底(di)物加(jia)2.5mL蒸(zheng)餾水或純(chun)凈水溶(rong)解 ,使用時(shi)取(qu)20μL,4℃冰箱(xiang)保(bao)存(cun)。
2.4、 膽(dan)堿(jian)酯(zhi)酶(mei):酶(mei)制劑(ji)無(wu)需配(pei)制,可(ke)直接取(qu)用,使用時(shi)取(qu)100μL,4℃冰箱(xiang)保(bao)存(cun)。
3、樣品(pin)提取(qu)
取(qu)2g果蔬(shu)樣(yang)品(pin)(塊莖類取(qu)4g),葉(ye)菜剪成(cheng)25px左(zuo)右(you)見(jian)方(fang)的碎片(pian),塊莖類取(qu)橫截(jie)面(mian)樣品(pin)或取(qu)其(qi)表(biao)皮,放(fang)入(ru)三(san)角瓶(ping)中,加(jia)入(ru)10mL緩(huan)沖液(ye),振蕩1~2min ,倒(dao)出(chu)提取(qu)液(ye),靜置(zhi)2min,待(dai)測(ce)。若(ruo)提取(qu)液(ye)混濁(zhuo)或雜(za)質太多(duo)可過濾後(hou)再(zai)測。
4、測試
4.1、 對照測試:於反應瓶(ping)中加(jia)入(ru)2.5mL緩(huan)沖液(ye),再分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)100μL酶液(ye)和顯(xian)色劑,混勻,靜置(zhi)反應10min後(hou)加(jia)入(ru)100μL(或20μL)底(di)物,搖勻並(bing)立(li)即(ji)倒(dao)入(ru)比(bi)色杯(bei)中,及時(shi)放入(ru)儀器的測(ce)量室(shi)通道(dao)中。按<對照>鍵,顯(xian)示屏(ping)延遲(chi)設定(ding)秒(miao)數後(hou),測(ce)量時(shi)間(jian)開(kai)始倒(dao)計時(shi),計時(shi)完畢(bi),顯(xian)示屏(ping)顯(xian)示對照吸光(guang)度(du)增(zeng)量(liang)(ΔΑ),並(bing)提示完成(cheng)。在進(jin)行對照測試時(shi),其(qi)他通(tong)道(dao)可(ke)同時(shi)進(jin)行樣品(pin)測試。
4.2、樣品(pin)測試:於反應瓶(ping)中加(jia)入(ru)2.5mL待測液(ye),再分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)100μL酶液(ye)和顯(xian)色劑,混勻,靜置(zhi)反應10min後(hou)加(jia)入(ru)100μL(或20μL)底(di)物,搖勻並(bing)立(li)即(ji)倒(dao)入(ru)比(bi)色皿(min)中,及時(shi)放入(ru)儀器的測(ce)量室(shi)通道(dao)。按<樣品(pin)>鍵,顯(xian)示屏(ping)下方(fang)延遲(chi)設定秒(miao)數後(hou),測(ce)量時(shi)間(jian)開(kai)始倒(dao)計時(shi),計時(shi)完畢(bi),顯(xian)示屏(ping)顯(xian)示樣品(pin)吸光(guang)度(du)增(zeng)量(liang)(ΔΑ)及抑制率(lv),並(bing)提示合(he)格或超(chao)標。數據可(ke)進(jin)行自動(dong)保(bao)存(cun),如有需要按<打印(yin)>鍵(jian)打(da)印(yin)。